TSI (Triple Sugar Iron) Agar được sử dụng để xác định vi khuẩn đường ruột bằng cách phát hiện nhanh quá trình lên men của lactose, glucose (có hoặc không sinh khí) và sucrose, cũng như tạo khí hydrogen sulfide.
NGUYÊN TẮC:
Quá trình lên men đường dẫn đến sự axit hóa làm cho phenol có màu đỏ (chỉ thị pH) chuyển sang màu vàng.
Việc phát hiện vi khuẩn chỉ lên men glucose được tạo điều kiện thuận lợi bằng cách giảm nồng độ của đường lactose hoặc sucrose xuống 1/10, do đó một lượng nhỏ axit tạo ra trên bề mặt nghiêng trong quá trình lên men bị oxy hóa nhanh chóng. Điều này làm cho màu đỏ trở lại nhanh chóng hoặc nếu không thì quá trình kiềm hóa lại rõ rệt hơn. Ngược lại, phản ứng axit (màu vàng) được duy trì ở độ sâu của thạch, ở đáy ống.
Vi khuẩn lên men lactose hoặc sucrose sẽ làm cho phần nghiêng của ống chuyển sang màu vàng.
Vi khuẩn không lên men loại đường nào trong số các loại đường này sẽ không làm thay đổi màu của môi trường.
Quá trình sản xuất H2S được thấy ở phần đáy ống thông qua sự xuất hiện của màu đen của iron sulfide, do sự khử thiosunfat khi có mặt của ferric citrate.
Việc tạo ra khí (H2, CO2), do quá trình lên men đường, được thể hiện qua sự xuất hiện của các bong bóng hoặc do sự phân mảnh của thạch.